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如何用液氮罐安全冷凍保存呢
時(shí)間:2020-04-22 11:05來(lái)源: 作者:班德液氮罐 點(diǎn)擊:
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細(xì)胞凍存是細(xì)胞生存的條件之一，細(xì)胞凍存都是采用的低溫液氮罐保溫特性，目的就是我們的細(xì)胞離開(kāi)生長(zhǎng)環(huán)境依然可正常生存，使用我們的液氮生物容器儲(chǔ)存細(xì)胞可以避免細(xì)胞污染現(xiàn)象，起到保護(hù)細(xì)胞的作用。
方法：
儀器采用液氮罐、凍存管、離心管、吸管等
試劑：0.25%胰酶、造就基
凍存液的配置：添加甘油或者DSMO，濃度達(dá)到20%，配好凍存液以后在4攝氏度才可以生存。
一：將消化細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)。
二：1000rpm離心10分鐘，棄上清液。
三：沉淀的情況下可以添加掩護(hù)液，然后將懸浮液分至凍存管內(nèi)，每管控制在1ml左右，然后密封起來(lái)，一定要密封嚴(yán)，否則會(huì)造成爆炸現(xiàn)象。
四：最后貼上標(biāo)簽，表明細(xì)胞名稱及日期。
五：溫度流程：室溫→4℃(20分鐘)→冰箱冷凍室(30分鐘)→低溫冰箱(-30℃ 1小時(shí))→氣態(tài)氮(30分鐘)→液氮。
最后提醒大家操縱液氮時(shí)應(yīng)該避免出現(xiàn)凍傷現(xiàn)象，一定要觀察液氮量，量少的話，隨時(shí)注意增補(bǔ)液氮量，不然的話會(huì)影響標(biāo)本的活性，一般30立方的液氮可以用1.5月，所以我們需要多留心些就好。
方法：
儀器采用液氮罐、凍存管、離心管、吸管等
試劑：0.25%胰酶、造就基
凍存液的配置：添加甘油或者DSMO，濃度達(dá)到20%，配好凍存液以后在4攝氏度才可以生存。
一：將消化細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)。
二：1000rpm離心10分鐘，棄上清液。
三：沉淀的情況下可以添加掩護(hù)液，然后將懸浮液分至凍存管內(nèi)，每管控制在1ml左右，然后密封起來(lái)，一定要密封嚴(yán)，否則會(huì)造成爆炸現(xiàn)象。
四：最后貼上標(biāo)簽，表明細(xì)胞名稱及日期。
五：溫度流程：室溫→4℃(20分鐘)→冰箱冷凍室(30分鐘)→低溫冰箱(-30℃ 1小時(shí))→氣態(tài)氮(30分鐘)→液氮。
最后提醒大家操縱液氮時(shí)應(yīng)該避免出現(xiàn)凍傷現(xiàn)象，一定要觀察液氮量，量少的話，隨時(shí)注意增補(bǔ)液氮量，不然的話會(huì)影響標(biāo)本的活性，一般30立方的液氮可以用1.5月，所以我們需要多留心些就好。
